Technique histologiques et immunohistochimiques
Service Mobile de Nécropsie
Notre équipe de techniciens experts et de pathologistes peut répondre à vos besoins de recherche en vous aidant à effectuer l’examen post-mortem et les prélèvements d’échantillons
Traitement complet des tissus
Nous fournissons une histologie de routine conforme aux BPL pour les études de pathologie toxicologique in vivo.
Plus précisément, nous produisons des lames colorées à l’hématoxyline et à l’éosine avec un contrôle qualité rigoureux. De plus, nous proposons des préparations complètes de lames ou que certaines étapes de préparation avec la capacité de préparer jusqu’à 300 lames par jour.
Nous pouvons réaliser, selon vos besoins, tout ou partie du processus histologique (recoupe-imprégnation-inclusion-coloration) : du tissu fixé à la lame, du tissu au bloc ou du bloc à la lame.
Etape de recoupe macroscopique
Réalisée selon vos exigences et/ou la norme R.I.T.A.
Consiste à recouper les tissus préalablement fixés (formol-AFA-Ethanol…) en cernant la zone d’intérêt ; la section ainsi réalisée est placée dans une cassette de format adapté et portant les numéros de l’échantillon et de l’étude ; ces cassettes sont identifiées à l’aide d’un graveur : automate permettant d’éviter les erreurs manuelles d’identification.
Etape de déshydratation-Imprégnation
Nous avons validé et mis au point des protocoles d’imprégnation adaptés à différents types d’échantillons et de support.
L’imprégnation est réalisée grâce à un équipement automatisé, moderne et régulièrement révisé.
Inclusion en paraffine
Cette étape consiste à réaliser un bloc de paraffine dans lequel est inclus l’échantillon.
L’inclusion est réalisée suivant l’orientation et le plan de coupe définis dans le plan de phase.
Histologie et colorations
Microtomie
Cette étape permet d’obtenir des coupes fines de 3-4µm.
Nos coupes sont effectuées avec des microtomes semi automatiques ou automatiques.
L’épaisseur de la coupe et l’espacement entre 2 sections sont préalablement définis dans le cahier des charges. La section ainsi réalisée est déposée sur une lame de verre identifiée à l’identique de la cassette via un graveur de lames garantissant ainsi la traçabilité.
Il nous est également possible de réaliser des coupes sériées en débitant le bloc jusqu’à épuisement dans le cadre de protocoles de recherches spécifiques.
Specificité des tissus « durs »
Nous sommes en mesure de réaliser des coupes en histologie classique pour des échantillons tels que les tissus osseux, les biomatériaux, les cartilages…nécessitant une décalcification préalable.
Nous pouvons aussi vous proposer une technique innovante de recoupe sans décalcification permettant de préserver les tissus adjacents (nous consulter).
Colorations
Nous réalisons des colorations standards ou spécifiques selon les tissus, vos besoins et le but recherché.
Les colorations sont réalisées par des automates garantissant ainsi la reproductibilité et l’homogénéité de la coloration.
Nous réalisons de manière routinière les colorations suivantes :
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- Toluidin Blue
- Luxol Fast Blue
- Alcaline Sirius Red
- Alcian Blue
- Safranin O Fast Green
- Luna
- Herovici
- Hematoxylin-eosin
- Hematoxylin-eosin saffron
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- Fontana Masson
- Periodic Acid Schiff
- May Grunwald et Giemsa
- Trichrome de Masson
- Bleu de Unna
- Orceine
- Rouge sirius
- Perl’s
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À la demande, il est possible de mettre au point d’autres types de coloration spécifique en fonction de vos projets.
Une lamelle est déposée sur la lame colorée via un automate de montage à sec.
Contrôle des lames réalisées
100% de nos lames sont vérifiées au microscope afin de s’assurer de la qualité de celles-ci (absence de bulles-Homogénéité de coloration- Absence d’artefacts…) ainsi que la présence de la zone tissulaire d’intérêt.
Immunohistochimie
L’immunohistochimie (IHC) est couramment utilisée pour analyser des biomarqueurs dans différents types de tissus.
Une équipe de scientifiques et de techniciens expérimentés étudie attentivement chaque étape de votre projet : Nous sommes dorénavant équipés d’une plateforme Discovery Ventana qui permet l’automatisation de l’ensemble des marquages.
